改良RNAディスプレイ法

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Applicant, Patent owner：
Agent (1)：特許業務法人川口國際特許事務所
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：2011530178
Publication number (International publication number)：2012504415
Application date： Sep. 30, 2009
Publication date： Feb. 23, 2012
Summary：

本発明は、発現ライブラリーからscFv抗体分子の確実な発現および選別を可能にするインビトロRNAディスプレイの改良法を特徴とする。改良法は、scFv鎖内ジスルフィド結合、従ってscFv抗体分子の正確なフォールディングに有利に働く弱還元条件の使用を部分的に含む。本発明の方法は、scFv抗体分子の発現および選別に特に適しているが、あらゆるクラスのタンパク質のインビトロRNAディスプレイにも都合が良い。

Claim (excerpt)：

(a)ピューロマイシンまたはそのアナログを3’末端に、ソラレンC6を5’末端に有する一本鎖核酸リンカーと架橋し、5’scFvおよび3’スペーサー配列をコードするmRNAを含む、ピューロマイシンまたはそのアナログと架橋した単鎖Fv(scFv)mRNA分子を提供するステップ、 (b)標識の存在下、標識ピューロマイシン架橋scFv mRNA/タンパク質分子が形成されるような条件下で、ピューロマイシン架橋scFv mRNAをインビトロ翻訳するステップ、 (c)標識ピューロマイシン架橋scFv mRNA/タンパク質分子を精製するステップ、 (d)精製された標識ピューロマイシン架橋scFv mRNA/タンパク質分子を少なくとも1種類の抗原を用いた抗原選別に付すステップおよび (e)精製された標識ピューロマイシン架橋scFv mRNA/タンパク質分子を、親和性に基づいた磁気ビーズを用いて回収するステップを含む、scFv抗体RNAディスプレイライブラリーをスクリーニングする方法。

IPC (3)：

C12Q 1/68 , G01N 33/53 , C40B 30/04

FI (3)：

C12Q1/68 A , G01N33/53 M , C40B30/04

F-Term (20)：

4B024AA11 , 4B063QA18 , 4B063QQ42 , 4B063QQ52 , 4B063QQ79 , 4B063QR08 , 4B063QR32 , 4B063QR36 , 4B063QR42 , 4B063QR48 , 4B063QR50 , 4B063QR55 , 4B063QR62 , 4B063QS03 , 4B063QS25 , 4B063QS28 , 4B063QS33 , 4B063QS34 , 4B063QS36 , 4B063QX07

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (4)

標的物質と相互作用するドメインポリペプチドの選抜取得方法および構造モチーフ配列の同定方法並びに分子設計方法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願2004-339301 Applicant：ゾイジーン株式会社
タンパク質のin vitroディスプレイ及び進化のための選択粒子としてのリボソーム複合体
Gazette classification：公表公報 Application number：特願平11-500386 Applicant：ベイブレイアムインスティテュート
ペプチドアクセプターの連結法
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2001-512922 Applicant：フィロスインク.

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Article cited by the Patent：

Cited by examiner (1)

Nature Biotechnology, 1997, Vol.15, pp.79-84

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