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J-GLOBAL ID:201303033099845230
微量mRNAの増幅方法およびその利用
Inventor:
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Applicant, Patent owner:
Agent (1):
特許業務法人原謙三国際特許事務所
Gazette classification:特許公報
Application number (International application number):2008534286
Patent number:5078038
Application date: Aug. 29, 2007
Claim (excerpt):
【請求項1】 微量mRNAを含む溶液にダミーRNAを添加して混合溶液を作製する第1工程と、
混合溶液を鋳型として用いた逆転写反応によって、アンチセンスDNAを合成する第2工程と、
合成されたアンチセンスDNAに対して相補的なセンスDNAを合成して、センスDNAとアンチセンスDNAとからなる二本鎖DNAを形成する第3工程と、
形成された二本鎖DNAのセンスDNAの5’末端側にRNAポリメラーゼのプロモーター配列を連結して増幅用二本鎖DNAを作製する第4工程と、
RNAポリメラーゼによって、増幅用二本鎖DNAからRNAを増幅する第5工程と、を含み、
前記ダミーRNAの配列が、ポリA配列を含み、
前記第2工程では、プライマーとしてオリゴdTプライマーを用いることを特徴とする微量mRNAの増幅方法。
IPC (2):
C12N 15/09 ( 200 6.01)
, C12Q 1/68 ( 200 6.01)
FI (2):
C12N 15/00 ZNA A
, C12Q 1/68 A
Patent cited by the Patent:
Cited by examiner (1)
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微量mRNA及びcDNAの増幅方法
Gazette classification:公開公報
Application number:特願2001-041428
Applicant:科学技術振興事業団
Article cited by the Patent:
Cited by examiner (3)
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Journal of Virological Methods, 1991, Vol.35, p.273-286
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EMBO reports, 2002, Vol.3, No.4, p.367-372
-
Journal of Biological Chemistry, 1980, Vol.255, No.10, p.4495-4500
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