エラーを最少限に抑える核酸分子の合成のための材料及び方法

Inventor： , ,
Applicant, Patent owner：
Agent (12)：清水初志 , 春名雅夫 , 山口裕孝 , 刑部俊 , 井上隆一 , 佐藤利光 , 新見浩一 , 小林智彦 , 渡邉伸一 , 大関雅人 , 五十嵐義弘 , 川本和弥
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：2014555797
Publication number (International publication number)：2015509005
Application date： Feb. 01, 2013
Publication date： Mar. 26, 2015
Summary：

核酸分子のエラー訂正に有用な材料及び方法を提供する。ヌクレオチドミスマッチを有する第1の複数の二本鎖核酸分子を、分子の末端又は末端の近傍にてミスマッチを有する二本鎖核酸分子を残す一方向性のミスマッチエンドヌクレアーゼ活性を有する分子への暴露によって断片化する。次いでその核酸分子を一方向性のエキソヌクレアーゼ活性を有する分子に暴露してミスマッチであるヌクレオチドを取り除く。次いで欠けているヌクレオチドを、たとえば、DNAポリメラーゼ活性を有する分子の作用によって埋めることができる。結果はヌクレオチドミスマッチの頻度が低い二本鎖核酸分子である。提供されるのはまた、ミスマッチエンドヌクレアーゼをコードする新規の核酸配列、それによってコードされるポリペプチド、同様に核酸構築物、遺伝子導入細胞、及びそれらの種々の組成物である。

Claim (excerpt)：

(a)少なくとも1つのヌクレオチドミスマッチを含む第1の複数の二本鎖核酸分子を得る工程と、 (b)ミスマッチを有する核酸分子を一方向性のミスマッチエンドヌクレアーゼ活性を有する少なくとも1つの分子と反応させることによって、ミスマッチを有する前記複数の二本鎖核酸分子を断片化する工程と、 (c)(b)のミスマッチを有する断片化二本鎖核酸分子と、(b)の一方向性ミスマッチエンドヌクレアーゼ活性と同じ方向性の一方向性エキソヌクレアーゼ活性を有する少なくとも1つの分子とを反応させることによって、前記ヌクレオチドミスマッチを取り除いて、断片化したエラーがない二本鎖核酸分子を提供する工程と、 (d)(c)の断片化したエラーがない二本鎖核酸分子を含む第2の複数の二本鎖核酸分子を構築する工程であって、第2の複数の二本鎖核酸分子は第1の複数の二本鎖核酸分子に比べてヌクレオチドミスマッチの頻度が低い、工程とを含む、核酸分子のエラー訂正の方法。

IPC (7)：

C12N 15/09 , C12N 1/15 , C12N 1/19 , C12N 1/21 , C12N 5/10 , C12N 9/10 , C12N 9/22

FI (7)：

C12N15/00 A , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/00 101 , C12N9/10 , C12N9/22

F-Term (30)：

4B024AA01 , 4B024AA20 , 4B024BA10 , 4B024BA11 , 4B024CA01 , 4B024DA01 , 4B024DA02 , 4B024DA05 , 4B024DA11 , 4B024EA04 , 4B024GA11 , 4B024HA08 , 4B050CC03 , 4B050DD01 , 4B050EE10 , 4B050LL01 , 4B050LL10 , 4B065AA01X , 4B065AA26X , 4B065AA57X , 4B065AA87X , 4B065AA90X , 4B065AA98Y , 4B065AB01 , 4B065BA02 , 4B065CA24 , 4B065CA27 , 4B065CA31 , 4B065CA44 , 4B065CA60

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (6)

ヘテロ二本鎖の相補性を増大させる方法
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2002-578470 Applicant：ラージスケールバイオロジーコーポレイション
ミスマッチエンドヌクレアーゼ及び使用方法
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2003-566160 Applicant：ラージスケールバイオロジーコーポレイション
ポリヌクレオチド配列改変体
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2005-504649 Applicant：ラージスケールバイオロジーコーポレーション

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Article cited by the Patent：

Cited by examiner (4)

Nucleic Acids Research, 2012, 40(3), e23, Epub 2011 Nov 29
Cell, 2006, 126, pp.297-308
Nucleic Acids Research, 2012, 40(3), e23, Epub 2011 Nov 29

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