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J-GLOBAL ID：201102220141641425   整理番号：11A0159472

超好熱性古細菌Thermococcus kodakaraensis由来Tkセルピンでのキモトリプシン様とスブチリシン様セリンプロテアーゼの阻害

Inhibition of chymotrypsin- and subtilisin-like serine proteases with Tk-serpin from hyperthermophilic archaeon Thermococcus kodakaraensis

著者 (4件)： TANAKA Shun-ichi ,  KOGA Yuichi ,  TAKANO Kazufumi ,  KANAYA Shigenori
資料名： Biochimica et Biophysica Acta  (Biochimica et Biophysica Acta)
巻： 1814  号： 2  ページ： 299-307  発行年： 2011年02月 
JST資料番号： B0207A  ISSN： 0005-2728  CODEN： BBBMBS  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 超好熱性古細菌Thermococcus kodakaraensis由来のセルピンホモログ(Tkセルピン)を大腸菌で大量生産し,精製,特性解析を行った。Tkセルピンは二次会合速度定数(k_ass)が40°Cで5.2×10³M^-1s^-1,80°Cで3.1×10⁵M^-1s^-1で同一生物のTkスブチリシン(TKS)を不可逆的に阻害したことから,Tkセルピンが40°Cより80°Cでより強くTKSを阻害することが示された。それは80°CでのTKSに対するk_ass値に匹敵する定数でキモトリプシン,スブチリシンCarlsbergとプロテイナーゼKも40°Cで不可逆的に阻害した。阻害性セルピンに典型的なSDS抵抗性複合体形成によりTkセルピンがこれらプロテアーゼを阻害することをカゼインザイモグラフィーで示した。1モルのプロテアーゼを阻害するのに必要なTkセルピンのモル比(阻害化学量論,SI)は20°Cで40から80と変動したが,温度が高くなると最小値の3~7に低下した。これらのプロテアーゼに対するTkセルピンの阻害活性はこれらプロテアーゼの安定性が低下すると増加したことから,プロテアーゼの活性部位の柔軟性がTkセルピンによる阻害に対するプロテアーゼ安定性の決定要因の一つであることが示唆された。Tkセルピンがキモトリプシン様とスブチリシン様セリンプロテアーゼの両方を阻害し,温度が100°Cまで高まるとその阻害活性が増加することをこの報告で初めて示した。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *古細菌 ,  高温菌 ,  *セルピン ,  キモトリプシン ,  ズブチリシン ,  *セリンプロテイナーゼ ,  *酵素阻害 ,  大腸菌 ,  遺伝子発現 ,  精製 ,  温度依存性 ,  タンパク質複合体 ,  カゼイン ,  活性部位 ,  安定性 ,  アミノ酸配列 ,  相同性 ,  濃度依存性 ,  経時変化
準シソーラス用語： *Thermococcus kodakaraensis ,  ザイモグラフィー ,  プロテイナーゼK ,  酵素安定性

分類 (4件)： 微生物の生化学  (EG03020N) ,  生物学的機能  (EB03040U) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (8件)： 好熱性 ,  古細菌 ,  Thermococcus ,  セルピン ,  キモトリプシン ,  スブチリシン ,  セリンプロテアーゼ ,  阻害