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J-GLOBAL ID：201202259164481841   整理番号：12A1254408

マイクロプレートハイブリダイゼーションアッセイによる健康なコモンマーモセットにおけるT細胞受容体V領域レパートリーの定量分析のための新しい方法

A new method for quantitative analysis of the T cell receptor V region repertoires in healthy common marmosets by microplate hybridization assay

著者 (18件)： KITAURA Kazutaka (Dep. of Rheumatology and Clinical Immunology, Clinical Res. Center for Allergy and Rheumatology, Sagamihra National ...) ,  KITAURA Kazutaka (Dep. of Virology 1, National Inst. of Infectious Diseases, Tokyo, JPN) ,  FUJII Yoshiki (Dep. of Rheumatology and Clinical Immunology, Clinical Res. Center for Allergy and Rheumatology, Sagamihra National ...) ,  FUJII Yoshiki (Dep. of Virology 1, National Inst. of Infectious Diseases, Tokyo, JPN) ,  MATSUTANI Takaji (Lab. of Immune Regulation, Wakayama Medical Univ., Osaka, JPN) ,  SHIRAI Kenji (Dep. of Rheumatology and Clinical Immunology, Clinical Res. Center for Allergy and Rheumatology, Sagamihra National ...) ,  SHIRAI Kenji (Dep. of Virology 1, National Inst. of Infectious Diseases, Tokyo, JPN) ,  SUZUKI Satsuki (Section of Biological Sci., Res. Center for Odontology, Nippon Dental Univ., School of Life Dentistry, Tokyo, JPN) ,  TAKASAKI Tomohiko (Dep. of Virology 1, National Inst. of Infectious Diseases, Tokyo, JPN) ,  SHIMADA Shin (Dep. of Immunology, Div. of Basic Medical Sci. and Molecular Medicine, Tokai Univ. School of Medicine, Kanagawa, JPN) ,  KAMETANI Yoshie (Dep. of Immunology, Div. of Basic Medical Sci. and Molecular Medicine, Tokai Univ. School of Medicine, Kanagawa, JPN) ,  SHIINA Takashi (Dep. of Molecular Life Sci., Div. of Basic Medical Sci. and Molecular Medicine, Tokai Univ. School of Medicine ...) ,  TAKABAYASHI Shuji (Experimental Animals Inst., Hamamatsu Univ. School of Medicine, Shizuoka, JPN) ,  KATOH Hideki (Experimental Animals Inst., Hamamatsu Univ. School of Medicine, Shizuoka, JPN) ,  KATOH Hideki (Lab. of Animal Breeding and Genetics, Central Inst. for Experimental Animals, Kawasaki, JPN) ,  OGASAWARA Kouetsu (Dep. of Immunology, Inst. of Dev., Aging and Cancer, Tohoku Univ., Sendai, JPN) ,  KURANE Ichiro (Dep. of Virology 1, National Inst. of Infectious Diseases, Tokyo, JPN) ,  SUZUKI Ryuji (Dep. of Rheumatology and Clinical Immunology, Clinical Res. Center for Allergy and Rheumatology, Sagamihra National ...)
資料名： Journal of Immunological Methods  (Journal of Immunological Methods)
巻： 384  号： 1-2  ページ： 81-91  発行年： 2012年10月31日 
JST資料番号： E0816B  ISSN： 0022-1759  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： コモンマーモセット,Callithrix jacchusは最小の霊長類の一つで,多くの研究分野で実験的な非ヒト霊長類モデルとしてますます用いられている。T細胞受容体(TCR)レパートリーの解析は,TCR発現の抗原特異性及び可変性に関してT細胞免疫を研究する強力なツールである。しかしながら,多くのTCR Vα又はVβ鎖に特異的なモノクローナル抗体が作製されていない。最近著者らは,コモンマーモセットのcDNAライブラリーから数多くのTCRα鎖可変(TRAV)及びTCRβ鎖可変(TRBV)配列を同定した。この研究の目的は,この配列情報を用いてコモンマーモセットのTCRレパートリー解析のための新しい方法を開発することである。この方法は,32 TRAV特異的及び32 TRBV特異的オリゴプローブとその後のアダプター連結PCRを用いたマイクロプレートハイブリダイゼーション技術に基づいている。これは,それぞれのTRAV及びTRBV発現値を容易に定量できる。特異的オリゴプローブ間に交差ハイブリダイゼーションはなく,同じ試料の反復測定で非常に低い分散が見られ,高い特異性と再現性を示した。更にこの方法は,マーモセットVβと特異的に結合する抗ヒトVβ23抗体により確認された。この方法を用いて,著者らは各種組織試料(PBMCs,脾臓,リンパ節及び胸腺)及び10匹のコモンマーモセットの胸腺から分離したT細胞亜集団(CD4⁺CD8⁺,CD4⁺CD8^-及びCD4^-CD8⁺)でTCRレパートリーを解析した。組織特異的又はT細胞亜集団特異的相違のいずれもが,TRAV及びTRBVレパートリーで見られなかった。これらの結果は,マウスと異なり,コモンマーモセットのTCRレパートリーは内因性のスーパー抗原により影響されず,個体間,組織間及びT細胞亜集団間で保持されていることを示唆する。それ故に高い特異性と再現性をもつTCRレパートリー解析は,その多くがまだ入手できないTRV特異的抗体のパネルを用いたフローサイトメトリーに置き換わる可能性のある非常に有用な技術である。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *マーモセット ,  *T細胞受容体 ,  モノクローナル抗体 ,  遺伝子ライブラリー ,  結合部位 ,  プローブ ,  *実験用器具 ,  *分子ハイブリダイゼーション ,  分散【variance】 ,  胸腺 ,  単球 ,  脾臓 ,  リンパ節 ,  スーパー抗原 ,  オリゴヌクレオチド ,  T細胞
準シソーラス用語： Tリンパ球 ,  Callithrix jacchus ,  CD4+CD8+T細胞 ,  CD4+CD8-T細胞 ,  CD4-CD8+T細胞 ,  cDNAライブラリー ,  PBMC ,  *TCR【受容体】 ,  TCRα鎖 ,  TCRβ鎖 ,  *コモンマーモセット ,  *ハイブリダイゼーション ,  *マイクロプレート ,  可変領域

分類 (2件)： 遺伝学研究法  (EC01020N) ,  細胞膜の受容体  (EF04030C)

タイトルに関連する用語 (4件)： コモンマーモセット ,  T細胞受容体 ,  V領域 ,  定量分析