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J-GLOBAL ID：201302296053205101   整理番号：13A0238189

共鳴エネルギー移動に基づいたペリプラズム結合蛋白質バイオセンサにおける蛍光を対象にした生物ルミネセンス置換の利点

Advantages of substituting bioluminescence for fluorescence in a resonance energy transfer-based periplasmic binding protein biosensor

著者 (4件)： DACRES Helen (CSIRO Food Futures National Res. Flagship & Ecosystem Sciences, Australia, Canberra ACT 2601, AUS) ,  MICHIE Michelle (CSIRO Food Futures National Res. Flagship & Ecosystem Sciences, Australia, Canberra ACT 2601, AUS) ,  ANDERSON Alisha (CSIRO Food Futures National Res. Flagship & Ecosystem Sciences, Australia, Canberra ACT 2601, AUS) ,  TROWELL Stephen C. (CSIRO Food Futures National Res. Flagship & Ecosystem Sciences, Australia, Canberra ACT 2601, AUS)
資料名： Biosensors & Bioelectronics  (Biosensors & Bioelectronics)
巻： 41  ページ： 459-464  発行年： 2013年03月15日 
JST資料番号： D0173C  ISSN： 0956-5663  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： N末端で緑色蛍光蛋白質(GFP²)をC端でRenillaルシフェラーゼ変異体(RLuc2)を隣接させたマルトース結合蛋白質(MBP)から構成する遺伝子的にコードしたマルトースバイオセンサを作製した。この生物ルミネセンスエネルギー移動²(BRET²)系は,当量の蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)バイオセンサでの10%増加に比べて,マルトース結合に対してBRET比において30%の増加を示した。BRET²は,FRETよりもMBPのN末端及びC末端の既知分離へのフェルスター距離に良く一致した。本センサは,マルトースとマルトトリオースに応答し,この応答は,BRET²タグのMBP蛋白質における単一点変異導入によって完全に消滅した。BRET²系の半値最大効果濃度(EC₅₀)は,FRETベースのバイオセンサに対してEC₅₀が2.3μMであり0.3μM~21.1μMの直線的応答範囲に比べてマルトースに対して0.37μMであり,10nMから3.16μMマルトースの殆んど3桁の対数範囲で直線性を示した。本バイオセンサでのビール試料中のマルトース濃度は,市販のELISA法と一致したが,より迅速でより正確であったことから,実試料への応用の可能性を示した。類似のBRET²ベースのエネルギー変換スキーム手法は,「venus-fly-trap」機構を有する他の結合蛋白質への適用可能である。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *バイオセンサ ,  細菌タンパク質 ,  タンパク質 ,  共鳴エネルギー ,  蛍光 ,  緑色蛍光タンパク質 ,  ルシフェラーゼ ,  *糖タンパク質 ,  生物ルミネセンス ,  エネルギー移動 ,  *蛍光共鳴エネルギー移動 ,  末端基 ,  点突然変異 ,  ビール ,  エネルギー変換 ,  吸収スペクトル ,  濃度依存性 ,  二糖類 ,  ピラノシド ,  グルコシド ,  還元糖 ,  ヘキソース ,  アルドース ,  三糖類
準シソーラス用語： C末端 ,  N末端 ,  Renillaルシフェラーゼ ,  *マルトース結合蛋白質 ,  ペリプラズム結合蛋白質

分類 (2件)： 分析機器  (CC02020S) ,  バイオアッセイ  (EA03060N)

物質索引 (2件)： マルトース ,  マルトトリオース

タイトルに関連する用語 (7件)： 共鳴エネルギー移動 ,  ペリプラズム結合蛋白質 ,  バイオセンサ ,  蛍光 ,  生物ルミネセンス ,  置換 ,  利点