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J-GLOBAL ID：201402258781762651   整理番号：14A0538226

酵母高細胞密度システムによるシイタケ細胞内ラッカーゼの分泌発現:表現が難しい分泌蛋白質のサブミリグラム生産物

Secretory expression of Lentinula edodes intracellular laccase by yeast high-cell-density system: Sub-milligram production of difficult-to-express secretory protein

著者 (9件)： KUROSE Takeshi (Biomolecular Engineering Lab, Graduate School of Integrated Pharmaceutical and Nutritional Sciences, Univ. of ...) ,  SAITO Yuta (School of Food and Nutritional Sciences, Univ. of Shizuoka, Yada 52-1, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, JPN) ,  KIMATA Koichi (School of Food and Nutritional Sciences, Univ. of Shizuoka, Yada 52-1, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, JPN) ,  NAKAGAWA Yuko (Iwate Biotechnology Res. Center, 22-174-4 Narita, Kitakami, Iwate 024-0003, JPN) ,  YANO Akira (Iwate Biotechnology Res. Center, 22-174-4 Narita, Kitakami, Iwate 024-0003, JPN) ,  ITO Keisuke (Biomolecular Engineering Lab, Graduate School of Integrated Pharmaceutical and Nutritional Sciences, Univ. of ...) ,  ITO Keisuke (School of Food and Nutritional Sciences, Univ. of Shizuoka, Yada 52-1, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, JPN) ,  KAWARASAKI Yasuaki (Biomolecular Engineering Lab, Graduate School of Integrated Pharmaceutical and Nutritional Sciences, Univ. of ...) ,  KAWARASAKI Yasuaki (School of Food and Nutritional Sciences, Univ. of Shizuoka, Yada 52-1, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, JPN)
資料名： Journal of Bioscience and Bioengineering  (Journal of Bioscience and Bioengineering)
巻： 117  号： 6  ページ： 659-663  発行年： 2014年06月 
JST資料番号： G0535B  ISSN： 1389-1723  CODEN： JBBIF6  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 細胞内ラッカーゼに関する多くの異種発現システムが報告されてきたが,細胞内相対物についてはほとんどない。シイタケ細胞内ラッカーゼLcc4は,その特異な基質特性から工業的利用の酵素として潜在性がある。しかし,発現依存的毒性のため細胞内ラッカーゼの異種生産は難しい。既報で,高細胞密度で誘起基質に懸濁している時のみ,組換え酵母細胞がLcc4を合成し分泌することを示した(J. Biosci. Bioeng., 113, 154-159, 2012)。高細胞密度システムは多くに利用でき,他の表現が難しい分泌蛋白質に適用できる。システムはエアレーションに大きく依存するため,酵素や他の蛋白質の生産スケールアップに障害となり,Lcc4の分泌経路や酵素特徴は分からないままになっている。本報では,高細胞密度システムにジャー発酵器を適用した成功裏なLcc4生産を示した。十分なエアレーションにより高収量となり(0.6mg/L),均一性のある酵素を調製し精製できる。酵素は高グルコシル化蛋白質として分泌され,SDS-PAGEにおいてバンドの形成が不正確となる。アミノ酸配列分析から,分泌信号としてN末端17残基が認識された。組換え酵素には自然発生のLcc4と同様の酵素特性が見られた。潜在的な利用者へ有用な情報を含むスケールアップした発現システムについても示した。Copyright 2014 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *シイタケ ,  *ジフェノールオキシドレダクターゼ ,  細胞内蓄積 ,  *酵母 ,  エアレーション ,  組換タンパク質 ,  細胞密度 ,  糖タンパク質 ,  *ラッカーゼ ,  高細胞密度 ,  組換酵素 ,  微生物酵素 ,  *微生物

分類 (1件)： 微生物酵素の生産  (FK03030L)

引用文献 (19件)：

• Mayer, A. M. and Staples, R. C.: Laccase: new functions for an old enzyme, Phytochemistry, 60, 551-565 (2002).
• Leonowicz, A., Matuszewska, A., Luterek, J., Ziegenhagen, D., Wojtas-Wasilewska, M., Cho, N.-S., Hofrichter, M., and Rogalsky, J.: Biodegradation of lignin by white rot fungi, Fungal Genet. Biol., 27, 175-185 (1999).
• Osma, J. F., Toca-Herrera, J. L., and Rodriguez-Couto, S.: Uses of laccases in food industry, Enzyme Res., 2010, 918761 (2010).
• Brijwani, K., Rigdon, A., and Vadlani, P. V.: Fungal laccases: production, function, and applications in food processing, Enzyme Res., 2010, 149748 (2010).
• Rodgers, C. J., Blanford, C. F., Giddens, S. R., Skamnioti, P., Armstrong, F. A., and Gurr, S. J.: Designer laccases: a vogue for high-potential fungal enzymes? Trends Biotechnol., 28, 63-72 (2009).

タイトルに関連する用語 (8件)： 酵母 ,  高細胞密度 ,  シイタケ ,  ラッカーゼ ,  分泌 ,  発現 ,  表現 ,  分泌蛋白質