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J-GLOBAL ID:201902286470864422   整理番号:19A2336656

条件付きマウス対立遺伝子の生成のためのCRISPR-Cas9法の再現性:多施設評価【JST・京大機械翻訳】

Reproducibility of CRISPR-Cas9 methods for generation of conditional mouse alleles: a multi-center evaluation
著者 (105件):
資料名:
巻: 20  号:ページ: 1-14  発行年: 2019年 
JST資料番号: U7384A  ISSN: 1474-760X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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CRISPR-Cas9遺伝子編集技術はノックアウトマウスの生成を促進し,面倒で時間がかかる従来の胚幹細胞に基づく方法の代替法を提供する。2つの単一ガイドRNA(sgRNA)と2つの一本鎖オリゴヌクレオチドをドナーとしてマイクロインジェクション(sgRNA)と2つの一本鎖オリゴヌクレオチドをドナーとして用いて,条件付きノックアウト(cKOまたはfloxed)対立遺伝子の発生において16%の効率までの以前の研究が報告されている。著者らは,世界中の20の研究所の共同体から2つのドナー方法を再評価した。データセットは,56の遺伝子座,17887の接合子および1718の生きたマウスを構成し,そのうち15(0.87%)のマウスのみがcKO対立遺伝子を含んでいた。データセットを統計解析と機械学習アルゴリズムに従い,解析した因子のどれもこの方法の成功を予測しないことを明らかにした。著者らは,2ドナーアプローチがcKO対立遺伝子を産生できない18の遺伝子座に1ドナーDNAを用いるいくつかの新しい方法を試験した。著者らは,1-ドナー法が2-ドナー法より10~20倍効率的であることを見出した。著者らは,2つのドナー方法が,それがcisにおける2つの同時再結合イベントに依存するので,効率を欠いていることを提案する。それは,望ましくない編集イベントを伴う普及によってdwar与えたされる結果である。1つのドナーDNAを使用する方法は,それらが1つの再結合イベントだけに依存するので,かなり効率的であり,予想されていない突然変異イベントのないドナーカセットの正しい挿入の確率は非常に高い。したがって,1ドナー法は,cKO動物モデルのルーチン発生に対してより高い効率を提供する。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
分類
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遺伝子の構造と化学  ,  遺伝子発現  ,  分子遺伝学一般 

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