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J-GLOBAL ID:202002230678461262   整理番号:20A2759512

オロチジン-5ペルメアーゼ-デカルボキシラーゼ遺伝子pyrGの破壊または減少した発現はクエン酸産生を増加させる:Aspergillus nigerにおけるリサイクル可能なゲノム編集中の新たな発見【JST・京大機械翻訳】

Disruption or reduced expression of the orotidine-5′-decarboxylase gene pyrG increases citric acid production: a new discovery during recyclable genome editing in Aspergillus niger
著者 (16件):
資料名:
巻: 19  号:ページ: 1-12  発行年: 2020年 
JST資料番号: U7049A  ISSN: 1475-2859  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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Aspergillus nigerは,グローバルなクエン酸生産の大部分に使用される糸状菌である。ゲノム編集における最近の発展は,A.nigerを工学および最適化するバイオテクノロジーを現在可能にする。しかし,工業的A.niger分離株におけるクエン酸力価を最大にするための遺伝的リードは限られている。本研究では,2つのクエン酸A.niger生産分離株,WT-DおよびD353を工学し,将来のハイスループットゲノム工学のためのプラットフォーム菌株として役立つことを試みた。従って,ゲノム編集を用いて,pyrG選択/カウンター選択システムの使用を可能にし,相同組換率を上げるために,オルタジン-5′-デカルボキシラーゼ(pyrG)と非相同末端結合成分(kusA)をコードする遺伝子を同時に破壊した。これらのpyrG変異体株のルーチンスクリーニング中に,前駆体対照と比較した場合,クエン酸産生の2.17倍増加を予想外に観察し,ウリジン/ピリミジン合成の阻害がクエン酸力価を増加させることを示した。この仮説をさらに試験するために,pyrG遺伝子をテトラサイクリン滴定カセットの制御下で配置し,この遺伝子の発現低下が振とうフラスコとバイオリアクタ発酵の両方でクエン酸力価を増加させることを確認した。続いて,細胞内メタボロミクス分析を行い,pyrG破壊が解糖フラックスを増強し,クエン酸およびその前駆体の存在量を有意に改善することを示した。本研究では,pyrG/kusA欠失によるハイスループット遺伝子操作が可能な2つのクエン酸産生分離株を送達する。驚くべきことに,A.niger pyrGはクエン酸過剰産生株を生成するための有望な遺伝的リードであることを初めて示した。著者らのデータは,ウリジン/ピリミジン生合成経路が菌株工学努力のための将来の道筋を提供するという仮説を支持する。Copyright 2020 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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微生物代謝産物の生産 
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