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J-GLOBAL ID:202102253729960402   整理番号:21A0384700

Pan-Genome分析により明らかにした新規特異的標的に基づくFlammulina velutipes植物における病原性Listeriaの同定に対する多重PCR【JST・京大機械翻訳】

Multiplex PCR for the Identification of Pathogenic Listeria in Flammulina velutipes Plant Based on Novel Specific Targets Revealed by Pan-Genome Analysis
著者 (14件):
資料名:
巻: 11  ページ: 634255  発行年: 2020年 
JST資料番号: U7080A  ISSN: 1664-302X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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Listeria spp.は重要な食品媒介病薬であり,しばしば新鮮なキノコ(Flamulina velutipes)とその生産環境に見られる。本研究の目的は,F.velutipes植物におけるListeria monocytogenesおよびListeria ivanoviiの迅速同定のためのマルチプレックスPCRおよび非病原性Listeriaを開発することであった。Pan-ゲノム分析を最初に用いて,5つの新規Listeria特異的標的を同定した:Listeria属に対する1つ,L.monocytogenesのための1つ,およびL.ivanoviiのための3つ。新規標的のプライマーは,個々の反応で高度に特異的であった。検出限界は103~104CFU/mLであり,分子検出の要求を満たした。病原性Listeriaの同定のためのmPCRアッセイを,Listeria属(LMOSLCC2755_0944),リステリア菌(LMOSLCC2755_0090),およびL.ivanovii(queT_1)に特異的な新規遺伝子をターゲットとするプライマーを用いて設計した。アッセイ特異性は,非病原性Listeriaと非Listeria spp.菌株を分析することによりロバストに検証された。測定した検出限界は,L.monocytogenesで2.0×103CFU/mL,L.ivanoviiで3.4×103CFU/mLであった。さらに,このアッセイは4~12時間の濃縮後にF.velutipes試料にスパイクした病原性Listeriaの7.6×104から7.6×100CFU/10gを検出した。異なるF.velutipes植物から採取した129試料を分析することによって,アッセイの実現可能性を従来の培養ベース法と比較して評価した。Listeria spp.とL.monocytogenesの有病率はそれぞれ58.1%と41.1%であった。Listeria spp.,L.monocytogenesおよびL.ivanoviiに対するκ因子は,それぞれ0.97,0.97および1であった。新規mPCRアッセイの結果は,培養に基づく方法と非常に一致した。したがって,新しいアッセイは食品とその生産環境における病原性Listeriaの迅速,特異的,正確な検出とモニタリングを可能にするであろう。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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微生物検査法  ,  食品の汚染 
引用文献 (41件):

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