蛍光偏光法による核酸増幅産物の検出方法

Inventor： ,
Applicant, Patent owner：
Agent (1)：平木祐輔 (外1名)
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2001083428
Publication number (International publication number)：2002272475
Application date： Mar. 22, 2001
Publication date： Sep. 24, 2002
Summary：

【要約】【課題】蛍光偏光法による核酸増幅産物の検出方法の提供。【解決手段】 LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)反応により得られる核酸増幅産物を、一本鎖ループ部分にハイブリダイズする蛍光標識プライマーを添加して、反応液の蛍光偏光度を測定することにより検出する方法。

Claim (excerpt)：

以下の工程:(a) ポリヌクレオチド鎖上の標的領域の3'末端から該ポリヌクレオチド鎖の3'末端方向に向かって順に第1の任意配列F1c及び第2の任意配列F2cをそれぞれ選択し、標的領域の5'末端から該ポリヌクレオチド鎖の5'末端方向に向かって順に第3の任意配列R1及び第4の任意配列R2をそれぞれ選択する工程、(b) 前記F2cに対し相補的な配列F2及び該F2の5'側に前記F1cと同一の配列を含むプライマー、前記R2と同一の配列及び該配列の5'側に前記R1に対し相補的な配列R1cを含むプライマー、並びに前記F1cと前記F2cとにより挟まれた配列、前記F1cと前記F2cとにより挟まれた配列の相補的配列、前記R1と前記R2とにより挟まれた配列、若しくは前記R1と前記R2とにより挟まれた配列の相補的配列の少なくとも一部を含む蛍光標識プローブをそれぞれ調製する工程、(c) 前記ポリヌクレオチド鎖を鋳型として、鎖置換型ポリメラーゼ及び前記プライマーの存在下でDNA合成反応を行う工程、(d) DNA合成反応後の反応液に前記蛍光標識プローブを添加する工程、及び(e) 蛍光標識プローブを添加した反応液の蛍光偏光度を測定する工程、を包含する核酸増幅産物の検出又は定量方法。

IPC (4)：

C12N 15/09 ZNA , C12Q 1/68 , G01N 33/53 , G01N 33/566

FI (4)：

C12Q 1/68 A , G01N 33/53 M , G01N 33/566 , C12N 15/00 ZNA A

F-Term (18)：

4B024AA11 , 4B024CA01 , 4B024CA09 , 4B024CA11 , 4B024HA13 , 4B063QA01 , 4B063QA18 , 4B063QQ42 , 4B063QR08 , 4B063QR32 , 4B063QR42 , 4B063QR56 , 4B063QR62 , 4B063QS03 , 4B063QS24 , 4B063QS25 , 4B063QS32 , 4B063QX02

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (5)

レジオネラ・ニューモフィラに由来する核酸の検出方法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願平11-021839 Applicant：軽部征夫, 鶴岡誠, 東和科学株式会社
蛍光偏光法による核酸の測定方法およびVero毒素生産菌の検出方法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願平9-219744 Applicant：鶴岡誠, 軽部征夫, 西川ゴム工業株式会社
核酸増幅の蛍光偏光検出法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願平8-304462 Applicant：ベクトン・ディッキンソン・アンド・カンパニー

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Article cited by the Patent：

Cited by examiner (5)

Nucleic Acids Res., 28[12](Jun 2000) p.e63(i-vii)
生化学, 72[8](2000) p.1094(3P-683)
日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集, 23rd(2000) p.379(1PB-186)

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