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J-GLOBAL ID:201202253605290402   整理番号:12A0364768

メチル-β-シクロデキストリンは網膜の円板膜由来プレニル化酵素の抽出及び精製に有用な化合物である

Methyl-β-cyclodextrin is a useful compound for extraction and purification of prenylated enzymes from the retinal disc membrane
著者 (4件):
資料名:
巻: 82  号:ページ: 168-173  発行年: 2012年03月 
JST資料番号: W0282A  ISSN: 1046-5928  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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cGMPホスホジエステラーゼ6(PDE6)及びロドプシンキナーゼ(GRK1)は脊椎動物の光情報伝達に関与する量的に微量なプレニル化蛋白質である。ここに,疎水性コアを持つドーナツ状の少糖類である,メチル-β-シクロデキストリン(MCD)はカエルの網膜の円板膜由来のプレニル化蛋白質等の選択的抽出剤として利用でき,MCDは極めて簡単な方法でカエルPDE6ホロ酵素を精製できることを報告した。円板膜の細胞質表面からGRK1及びPDE6を抽出するためのMCDのEC50は,それぞれ0.17,5.1mMであった。1mMの次に20mMのMCDによる膜の逐次抽出により,粗精製のGRK1及びPDE6をそれぞれ得た。20mM抽出液から,一段陰イオン交換カラムクロマトグラフィーを使い,PDE6ホロ酵素を精製できた。1mMのMCD抽出液から,GRK1をアフィニティークロマトグラフィーで更に精製した。限界ろ過によるMCDの除去の後,in vitroにおける光情報伝達系の再構成により酵素の完全性を確認した。MCDは,生体膜の細胞質表面由来のプレニル化表在性膜蛋白質の選択的抽出及び精製にとって有用な化合物であることが示された。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  動物の生化学 

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