特許

J-GLOBAL ID：201703011242589939

物体の2次元または3次元の位置調整のための高解像度顕微鏡および方法

発明者： カルクブレナー、トーマス ,  ヴォレシェンスキー、ラルフ
出願人/特許権者： カール ツァイス マイクロスコピー ゲーエムベーハー
代理人 (3件)： 恩田 誠 ,  恩田 博宣 ,  本田 淳
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願2016-191256
公開番号（公開出願番号）：特開2017-004024
出願日： 2016年09月29日
公開日（公表日）： 2017年01月05日
要約：

【課題】2次元または3次元の物体位置調整のための高解像度顕微鏡および方法を提供する。【解決手段】以下の方法ステップa)からo)の1つを含む。a)非球面レンズを用い粒子等の垂直位置を検出b)異なる光路長の2つの検出ビームが検出器上でずらして検出されるc)活性化等を多光子励起プロセスによって行うd)点走査の活性化等を行うe)線走査の活性化等を行うf)試料の励起/試料光の検出を広視野モードで行うg)既定の試料範囲が活性化/切替られるh)活性化/切替をAOTF等で行うi)格子によりーザパルスがスペクトル分割されるj)SLM等が格子後方レーザパルスの選択を行うことk)レーザ広視野励起は、SLM等によるl)ROIがSLM等によって選択されるm)多光子切替等を円柱レンズアレイによって行うn)切替/励起を線走査で行うo)線検出を複数のセンサから成る、2つのセンサ列を備えたスリット絞りの調整によって行う。【選択図】 なし

請求項（抜粋）：

物体の2次元または3次元の位置調整のための、試料の空間的な高解像度の蛍光顕微鏡検査法のための高解像度顕微鏡であって、該試料はマーキング分子によってマーキングされており、該マーキング分子は、信号によって、活性化可能であるか、または励起可能な状態に切り替え可能であり、該マーキング分子は、活性化された状態で、または切り替えられた状態で、初めて蛍光ビームの放出のために励起可能であり、その際この方法は、 1)試料中に存在するマーキング分子のただ1つのサブセットだけが活性化されるよう試料に信号を与えるステップであって、その際試料に部分領域が存在し、その中で活性化されたマーキング分子が最も近くで隣接した活性化されたマーキング分子に対して少なくとも1つの間隔を空けており、この間隔の大きさがあらかじめ定められた光学解像度から生じた長さより大きいかまたは同じである、前記試料に信号を与えるステップと、 2)活性化された分子を励起して蛍光ビームを放出するステップと、 3)あらかじめ定められた光学解像度を使用して蛍光ビームを検出するステップと、 4)ステップ3)で記録した蛍光ビームから単一画像を生成するステップであって、その際蛍光ビームを放出するマーキング分子の幾何学的位置が、あらかじめ定められた光学解像度によって高められた空間解像度を使用して算出される、前記単一画像を生成するステップと を含み、その際Z方向における検出の分割によるマルチレベル検出が、 結像ビーム路内にアナモルフィックレンズが配置されているか、または少なくとも1つのビームスプリッタが検出ビーム経路を少なくとも2つの部分ビーム経路に分割するために備えられており、該部分ビーム経路が検出レベル中で互いに空間的にずれていること、 活性化源、または励起可能な状態に切り替える切り替え源として、非線形試料励起のためのショートパルスレーザが備えられていること、ここで、格子が前記ショートパルスレーザのパルスをスペクトル分割するために配置され、異なる光学的経路を伝搬するスペクトル分割されたパルス成分は、顕微鏡の対物レンズの焦点面で合流して、前記焦点面で元のショートパルスレーザを形成し、分子を2光子吸収プロセスによって励起可能な状態に切替えるか、または2光子吸収プロセスによって分子を活性化するようにし、 試料を励起するために広視野照明を行うレーザが備えられていること によって行われ、 前記ショートパルスレーザによって試料の非線形励起が行われ、前記レーザを用いた広視野照明よって非線形励起された試料の蛍光励起が行われる、高解像度顕微鏡。

IPC (3件)：

G02B 21/00 ,  G01N 21/64 ,  G02B 21/26

FI (4件)：

G02B21/00 ,  G01N21/64 E ,  G01N21/64 F ,  G02B21/26

Fターム (26件)：

2G043AA03 ,  2G043BA16 ,  2G043EA01 ,  2G043FA01 ,  2G043FA02 ,  2G043FA06 ,  2G043GA01 ,  2G043GB01 ,  2G043GB18 ,  2G043HA01 ,  2G043HA02 ,  2G043HA09 ,  2G043HA15 ,  2G043JA02 ,  2G043KA01 ,  2G043KA02 ,  2G043KA05 ,  2G043KA08 ,  2G043KA09 ,  2G043LA03 ,  2G043NA01 ,  2H052AA09 ,  2H052AC04 ,  2H052AC34 ,  2H052AD16 ,  2H052AF21

引用特許：

審査官引用 (4件)

• 分解能の向上したルミネセンス顕微鏡
  公報種別：公表公報   出願番号：特願2011-506602   出願人：カールツァイスマイクロイメージングゲーエムベーハー
• 試料内の対象構造の高空間分解能結像
  公報種別：公表公報   出願番号：特願2011-509990   出願人：マックス-プランク-ゲゼルシャフトツルフォルデルングデルヴィッゼンシャフテンイー.ヴイ.
• 三次元の回折限界未満の画像解像技術
  公報種別：公表公報   出願番号：特願2010-539499   出願人：プレジデントアンドフェロウズオブハーバードカレッジ
• 顕微鏡
  公報種別：公開公報   出願番号：特願2008-073887   出願人：オリンパス株式会社