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J-GLOBAL ID:201702235271145732   整理番号:17A0747959

シンクロトロンベースのX線蛍光顕微鏡による分析のための付着性ほ乳類細胞における保存元素含有量【Powered by NICT】

Preserving elemental content in adherent mammalian cells for analysis by synchrotron-based x-ray fluorescence microscopy
著者 (11件):
資料名:
巻: 265  号:ページ: 81-93  発行年: 2017年 
JST資料番号: B0454B  ISSN: 0022-2720  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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微量金属は生物学的機能において重要な役割を果たし,X線蛍光顕微鏡法(X FM)は,細胞内でのそれらの分布を定量的に画像化する方法を提供する。これらの測定の忠実度は,適切な試料調製に依存している。例としてマウス胚性線維芽細胞NIH/3T3細胞を用いて,著者らは,周囲温度下でのX FMイメージングのための接着ほ乳類細胞の調製のための種々の方法を比較した。直接並列比較はプランジ凍結ベースcryoimmobilizationは接着ほ乳類細胞中のP,S,Cl,K,Fe,Cu,Zn及びCaを含む多くの生物学的に重要な元素のための従来の化学固定よりもより忠実な保存を提供することを示した。新鮮培地で洗浄細胞はClとCaの細胞外バックグラウンド信号の大きな関心を持っていたが,この方法は迅速凍結前の最良の可能な生理学的状態で細胞を維持し,他の元素のX FM分析を妨害しなかった。化学的固定は選択する必要があるならば,3%パラホルムアルデヒドおよび1.5%グルタルアルデヒドの併用は,他の固定液単独よりも優れたS,Fe,CuとZnを保持している。化学的に固定化した細胞は様々な脱水プロセスを実施した場合,空気乾燥は傾斜エタノール脱水と凍結乾燥のような他の乾燥法よりも適していることが証明された。X線蛍光顕微鏡法のためのこの最初の詳細な比較は,どのようにして詳細な定量的結論は細胞調製法の選択により影響されることを示した。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (1件):
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生体の顕微鏡観察法 

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